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The current situation of AIDS Tests

三、HIV RNA定量測定（病毒載量檢測）及HIV核酸定性檢測

HIV核酸檢測可用于HIV感染的輔助診斷、病程監(jiān)控、指導治療方案及療效判定、預測疾病進展等。常用的HIV病毒載量檢測方法包括逆轉(zhuǎn)錄PCR實驗（RT-PCR）、核酸序列擴增實驗（NASBA）、分支DNA雜交實驗（bDNA）以及實時熒光定量PCR技術(shù)。值得注意的是，每一種HIV RNA定量系統(tǒng)都有其最低檢測限，即可以測出的最低拷貝數(shù)或國際單位，RNA定量檢測時未測出不等于樣品中不含有病毒RNA，因此HIV核酸定性檢測陰性，只可報告本次實驗結(jié)果陰性，但不能排除HIV感染；HIV核酸檢測陽性，可作為診斷HIV感染的輔助指標，不能單獨用于HIV感染的診斷。報告HIV核酸定量檢測結(jié)果時應(yīng)按照儀器讀數(shù)報告結(jié)果，注明使用的實驗方法、樣品種類和樣品量，當測定結(jié)果小于最低檢測限時，應(yīng)注明最低檢測限水平。
HIV核酸定性檢測也可用于HIV感染的輔助診斷，目前在分析HIV基因亞型和變異等基礎(chǔ)研究中應(yīng)用。通常使用PCR或RT-PCR技術(shù)，使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑，引物可來自文獻或自行設(shè)計，應(yīng)盡量覆蓋所有或常見的毒株，也可使用復合引物。報告定性檢測結(jié)果時應(yīng)注明反應(yīng)條件和所使用的引物序列。此外，利用核酸檢測方法的高度敏感性，使用集合核酸擴增檢測技術(shù)和方法，對高度懷疑感染人群且抗體陰性的樣品進行集合核酸檢測，可及時發(fā)現(xiàn)窗口期感染者。該方法較單份樣品的核酸檢測具有更高的成本效益。
四、CD4+ T淋巴細胞計數(shù)

CD4+T淋巴細胞是人體免疫系統(tǒng)最重要的細胞之一。HIV以CD4+T淋巴細胞為靶細胞，感染后可導致CD4+T淋巴細胞進行性下降，使機體免疫功能受損，最終因機會性感染及腫瘤而死亡。CD4+T淋巴細胞絕對值的檢測在HIV感染的以下方面發(fā)揮了重要作用：了解機體的免疫狀態(tài)以確定疾病分期、監(jiān)測疾病進程、評估疾病預后、制定抗病毒治療及機會性感染預防性治療方案及評估抗病毒治療療效等。目前用于CD4+T淋巴細胞檢測的方法分為自動檢測方法和手工操作法。自動檢測方法包括流式細胞儀（單平臺一步法、多平臺三級程序法）和專門的細胞計數(shù)儀，手工操作方法則需要顯微鏡或酶聯(lián)免疫試驗設(shè)備。目前檢測CD4+T淋巴細胞數(shù)的標準方法為流式細胞儀，可得出CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞的絕對值及占淋巴細胞的百分率。為確保檢測的準確性，應(yīng)制定質(zhì)量保證計劃，建立內(nèi)部質(zhì)量控制制度，并參加室間質(zhì)量評價。

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